目前幾乎所有的臨床實驗室都用酶法檢測血清TG水平，雖然方法各異，但一般都包括3個基本步驟[3，5～7]：用最合適的LPL水解TG生成甘油和FFA;接著是轉化，該步驟一般只用一種酶，例如甘油激酶，將甘油磷酸化以進行下一步反應，或者生成中間待測物；最後是有色染料（常為醌亞胺等）或者紫外吸收物質的形成，再通過分光光度法計算相應的TG濃度。如脂蛋白脂肪酶-甘油磷酸氧化酶-過氧化物酶-4-氨基安替比林和酚法（GPO-PAP法）等。此法具有簡便快速、微量、精密度高的優點，且特異性強，易於達到終點，線性范圍寬。用一步法測定的是血清總甘油酯（定義為TG和FG及少量甘油二酯、甘油一酯之和，
習慣統稱為TG）。為了消除FG的干擾，中華醫學會檢驗分會曾推薦GPO-PAP法的兩步酶法作為血清TG常規測定方法[7]，該法不增加試劑成本和工作量，適合自動化分析，由於試劑分成兩部分加入，對正確設置分析測定參數有較高要求。對此法能否去淨游離甘油方面有人提出質疑。針對這一情況，近來中華醫學會檢驗分會在《關於臨床血脂測定的建議》文件中建議酶法如GPO-PAP法作為臨床實驗室測定血清TG的常規方法。普通臨床常規實驗室可采用一步GPO-PAP法，有條件的實驗室（如三級以上醫院）應考慮開展游離甘油的測定。血清FG對TG測定結果的影響一直是臨床十分關注的問題。國外資料顯示，正常人體血清FG含量為0.06～0.22mmol/L，約占總TG的6%～14%[3]。國內的研究結果與此相近，中國正常人血清FG水平平均約為0.08mmol/L（0.02～0.33mmol/L），約占總TG7.19%（0.81%～21.64%）。
雖然臨床標本中FG顯著升高者很少見，但有些異常或病理情況下如應激反應（腎上腺素激活LPL促進體內脂肪水解），劇烈運動，服用含甘油的藥物如硝酸甘油，靜脈輸入含甘油的營養液，肝素治療，某些嚴重的糖尿病、肝病與腎病，取血器材或試管塞上帶有甘油等時，可見血清FG顯著升高，並給臨床決策帶來誤導[3]。
因此，可采取測定“真”TG的方法減少其影響：一種是同時測定總甘油和FG，兩個結果的差值反應了真TG濃度（外空白法），另一種是用上文所述的兩步酶法直接測定TG（內空白法）。前者國內外應用較少，後者國外（如日本）使用較多，國內目前已有許多臨床實驗室開展。
